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尿沉渣分析儀配套試劑

摘要】  目的 研制可適用于Sysmex UF-50尿沉渣分析儀配套試劑。方法 自制UF-50配套試劑,利用熒光染色原理對尿液中的有形成分進行染色,通過儀器的分析單元對有形成分進行分析和計數。結果 自制試劑與原廠試劑對質控液進行的測試結果相近,CV值均小于10%。結論 自制的UF-50配套試劑可以取代原廠的試劑,可以達到節省試劑成本的目的 
【關鍵詞】  尿沉渣分析儀;尿液;配套試劑
    [Abstract]  Objective  To develop an applicable supplementary reagent to be used on Sysmex UF-50 urinary sediment analyzer.Methods  Development of a dedicated supplementary reagent for UF-50 by using fluorescence staining principle to stain the formed elements in urine was performed.With this reagent and the analyzing unit of the instrument,the formed elements can thus be analyzed and counted.Results  By using quality control reagent,test results obtained from the comparison between self-developed reagent and the reagent provided by UF-50 manufacturer were  so similar that its CV value was less than 10%.Conclusion  In order to be cost-effective,self-developed reagent can be used to replace the reagent provided by UF-50 manufacturer.
    [Key words]  urinary sediment analyzer;urine;supplementary reagent
    現今Sysmex(日本東亞)尿沉渣分析儀配套試劑一般為原廠提供或由G內生產企業采用進口試劑分裝,故試劑成本較高且供貨周期較長。部分G產試劑雖然價格相對便宜,但一般穩定性較差,以上原因制約了醫院檢驗科尿常規檢測尿沉渣計數分析項目的開展[1,2]。針對以上問題,我們對相關尿沉渣分析儀配套試劑進行了研發,通過檢測證明我公司研發的相關試劑性能及穩定性均較好,在保證測試效果的同時降低了尿沉渣計數的配套試劑使用成本,為配合G內廣大臨床醫院檢驗科尿沉渣計數分析項目向自動化方向發展起到了一定的促進作用。
    1  材料與方法
    1.1  材料
    1.1.1  儀器  Sysmex UF-50尿沉渣分析儀,冰點滲透壓計(上海醫大儀器廠),3250型電導率儀(上海任氏電子有限公司),pHS-3E型ph計上海雷磁儀器廠)。
    1.1.2  試劑  (1)自制試劑尿稀釋液:氯化鈉4 g/L,4-羥乙基哌嗪乙磺酸11 g/L,氫氧化鈉0.5 g/L,EDTA(2K)4 g/L。尿染液:菲啶染料0.14 g/100 ml、羰花青染料0.04 g/100 ml、乙二醇100 ml。尿鞘液:氯化鈉7.1 g/L、三羥甲基氨基甲烷緩沖液 2.0 g/L、乙二胺四乙酸二鉀0.2 g/L、聚氧乙烯非離子表面活性劑0.8 g/L。將配好的尿稀釋液、尿染液、尿鞘液分別用0.1 μm濾芯過濾器加以過濾。(2)對比試劑:Sysmex原廠試劑CELL SHEATH(鞘液),批號:G7083;URINOCATCH DILUENT(尿稀釋液),批號:ZR8001;URINOSERCH(尿染液),批號:UR8001。
    1.1.3  測試標本  UF CHECK(尿質控),批號:A8002。
    1.2  方法
    1.2.1  試劑理化參數的比較  使用冰點滲透壓計、電導率儀ph計分別測定原廠和自配試劑的滲透壓、電導率和pH值。
    1.2.2  對照試驗  (1)按UF-50尿沉渣分析儀操作說明書進行操作,shou先采用為原廠全套試劑,并執行灌注程序,保證管路已經灌滿原廠試劑,把原廠質控液上下顛倒搖勻后滴于試管中,并再次搖勻試管中的質控液后立即進行測試,重復20次,計算平均值(x)和偏差值(CV%)。(2)將原廠試劑排空,待出現報警時換接上自配試劑,并執行灌注程序,保證管路已經灌滿自配試劑,把原廠質控液上下顛倒搖勻后滴于試管中,并再次搖勻試管中的質控液后立即進行測試,重復20次,計算平均值(x)和偏差值(CV%)。
    2  結果
    2.1  兩種試劑主要理化參數的比較  見表1。
    2.2  對照試驗
    2.2.1  原廠試劑與自配試劑對照試驗質控標本數據結果  見表2。
    2.2.2  原廠試劑與自配試劑對照試驗質控標本散點圖  見圖1、2。表1  理化參數的比較表2  質控標本數據
  3  討論
  UF-50尿沉渣分析儀是采用流式細胞熒光散射強度和電阻抗變化的原理來對尿液中的有形成分進行綜合檢測。儀器自動吸取定量的尿液后加以混合和稀釋,然后用氮雜菲和羰花青對尿中的細胞、管型、細菌等有形成分進行染色,通過加壓使細胞進入充滿鞘液的液流室,在鞘液的作用下,細胞排成單列,經液流室的噴嘴噴出,形成的細胞柱與氬激光束垂直相交,使細胞產生熒光和光散射。光散射強度主要取決于細胞顆粒的大小,熒光強度與每種顆粒吸附的熒光染料量有關。不同的染色顆粒可產生不同的光散射強度和熒光強度。被染色的顆粒散射光和熒光越強,對應前向光脈沖信號越強,這是定性和定量分析的基礎。分析儀還配備了電阻抗變化檢測系統,在流動池的前、后方各裝有兩個電極并維持恒定的電流,當尿液樣品通過儀器的液流室小孔時,隨著不同顆粒和物質電阻抗的變化,兩個電極之間的電壓有相應的變化。UF-50全自動尿沉渣分析儀可以對紅細胞、白細胞、管型、細菌、結晶、上皮細胞等尿有形成分提供定量分析報告及散點圖,對于每一標本檢測步驟模式一致,不受主觀因素影響,易于質量控制和標準化,是一種高效率、高精度的可用于臨床治療監控的尿沉渣過篩檢測儀器。但由于尿沉渣分析儀存在不能具體辨認細胞形態及病理管型的類型的缺陷,故通常在臨床上只作為尿常規的篩查檢測。對其檢測的陽性標本,檢驗人員應本著對患者負責的態度,在顯微鏡下再行復檢,為臨床的診斷、療效的觀察提供確定的證據[3~5]。 表1中Sysmex原廠試劑與自配試劑的pH值、滲透壓、電導率數值相當,誤差均不超過10%,說明試劑濃度相當,配方效果接近。表2為原廠試劑與自配試劑對照試驗質控標本數據結果,其紅細胞、白細胞、管型、細菌、結晶、上皮細胞、電導率數據均較接近,CV值均小于10%。從圖1、圖2可以看出被測標本質控熒光強度(Fl)、前向熒光脈沖寬度(Flw)、前向散射光強度(Fsc)、前向散射光脈沖寬度(Fscw)、電阻抗信號綜合分析的紅細胞、白細胞及顆粒等的散射圖分布位置接近。自配試劑經過在G內相關醫院的長期試用,并與進口原裝Sysmex尿沉渣分析儀試劑和G內的同類型其他廠家試劑進行對比試驗,證明我公司自配的尿沉渣分析儀配套試劑在標本測試結果的準確性和穩定性方面均與進口試劑相近,并優于G內一般同類型尿沉渣分析儀試劑,故也可以替代現有G產或進口的同類型試劑。#p#分頁標題#e#

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